几种植物的组培技术简介

    非洲菊组培快繁技术
    非洲菊又名扶朗花、灯盏花，扶朗花属多年生草本。株高30—45厘米，头状花序高出叶面20—40厘米，重瓣花，花色有红、橙红、淡红、白色，四季有花以春秋为盛；花色艳丽，可用作切花生产或盆栽观赏。性喜温暖、向阳，不耐寒，忌炎热。常规方法是用种子各分株繁殖，但获得苗的数量有限，远不能满足市场的需要。
材料类别：花托、茎尖
    培养条件：（暂不提供）                
    诱导芽培养基：（1）MS+BA+KT
                  （2）1/2MS+BA
    诱导根培养基：（3）MS+IBA
    附加蔗糖30mg/l、琼脂7g/l,pH6.0。培养基灭菌方法见第二章第二节。培养温度25~27℃，光照10hd-1，光照强度2000lx。
生长和分化：
    初级培养 将外植体用自来水和蒸馏水冲洗干净，剪成1.0cm长的小段，在超净工作台（预先工作15min以上）上用0.1%氯化汞（HgCl2）对外植体进行表面消毒6~8min，小心倾去氯化汞溶液，再用无菌水冲洗3~4次，接种在培养基（1）上。接种前严格进行超净工作台面、用具、手的表面消毒，点燃酒精灯。在酒精灯火焰附近，去掉培养瓶的瓶盖，瓶口在酒精灯火焰灼烧一下，用镊子轻轻夹取外植体，栽入培养基中。不要碰到瓶口，在酒精灯上烧一下瓶口和瓶盖，迅速盖好瓶盖。将接种后的培养瓶摆放于培养室内培养。
    继代培养 培养6~7周以后，愈伤组织上陆续有小芽分化，此时将带有小芽的愈伤组织切成2~4个小块，分别移到新鲜培养基（1）上。培养一段时间后，又有小芽陆续分化。培养4周后，把这些继代培养的芽丛分割，并移到新鲜的培养基上。每次继代培养时间约为4周，芽丛的发生力可保持半年左右。在增殖培养基中加入硫酸腺嘌呤的，幼苗生长明显受到促进，且植株挺拔，叶色深绿。在每次继代前，高于3cm的小苗转入培养基（2）上，可促进幼苗迅速长大。在初级培养和继代培养时，降低MS中的氮素营养会导致芽的发生率降低，铵态氮和硝态氮之比为1：2时对非洲菊芽的增殖最好。
    生根 将长高的无根苗转移到培养基（3）上生根。生根率为84%以上。
    炼苗与移栽 欲移栽的组培苗先曲调瓶盖通风炼苗，3天后移入温室内的珍珠岩+腐殖土（1：1）基质中（基质先经高温高压或用高锰酸钾消毒），继续训化，在2周内保持较高的空气相对湿度，3周时幼苗长出白根，新叶抽出。移栽成活率97%。



地被菊组培快繁技术


[Dendranthema grandiflorum  (Ramatuelle) cvs.]


    地被菊品种伏地玉龙、浅黄、橙黄系北京林业大学园林学院陈俊愉教授经历多年培育出的3个新品种，均有较高观赏价值，而且具有较强的抗逆性（抗旱、抗寒、抗病虫、抗污染等），适生范围广。经过鉴定，伏地玉龙还具有较高的药用价值。但由于繁殖材料较少，难于大规模的生产，远远不能满足市场的需求。
    材料类别：带腋芽的茎段。
    培养条件：（暂不提供）
    启动培养基：（1）MS+6-BA+NAA
    诱导分化培养基：（2）MS+6-BA+NAA
    生根培养基 ：（3）1/2MS+IBA+NAA
    上述培养基均加入蔗糖20mg/l，0.5%琼脂，Ph值6.0。培养温度27℃，光照12h/d(人工光和散射光)。
    生长与分化 初级培养 取带腋芽的茎段，先用浓度0.1%的洗衣粉洗净，自来水冲洗15min，再于70%酒精中浸泡5~10s，用无菌水冲净，然后在0.1%升汞溶液中浸10min，无菌水冲洗3~4次，接种在启动培养基（1）中，经7天左右，腋芽开始萌动；20天左右，长成7~10mm的芽，并长出叶。
    增殖培养  切取启动培养基中的芽，转入分化培养基（2）中培养，促进丛生芽的形成。继代周期为25天，增殖系数为6。在诱导分化过程中，细胞分裂素含量对地被菊各品种的影响有所不同：在MS+6-BA+NAA中培养时，浅黄表现良好，形成丛生芽，叶子生长健壮；伏地玉龙和橙黄的腋芽萌发极少。后两者转接到MS+6-BA+NAA中时，则生长良好，形成丛生芽。
    生根 将分化良好的地被菊切成1~2cm长的茎段，接种到生根培养基（3）中。7天后可见切后口稍膨大，并出现绿色突起，10~15天长出大量不定根，生根率可达100%。
    移栽 当跟长到2cm以上，芽长3~4cm时，采用闭口全光照炼苗。经2周后，打开瓶盖，进行开口炼苗2~3天后，取出生根直接栽于有遮荫措施的苗圃中，栽种时使根系舒展、分布均匀，并且立即浇水。15天后成活率达到100%。





大花蕙兰组培快繁技术


    大花蕙兰为春兰只能感的名贵品种之一。根肉质，长而粗。茎节短，叶窄且长，暗绿色。晚春开花，花茎直立而长，花7~12朵，芳香。
    材料类别：圆球茎。
    培养条件：（暂不提供）
    诱导愈伤组织培养基：（1）MS+BA+NAA+活性炭
    增殖培养基：MS+BA+IBA+活性炭
    生根培养基：MS+IBA+NAA
    生长与分化：
    初级培养  选取幼小的圆球茎，在超净工作台上，表面消毒8分钟后，无菌水冲洗4次，接种于培养基（1）上培养2周后开始膨大并形成愈伤组织，再培养一段时间后，有少量芽分化。
    增殖  将愈伤组织转移到培养基（2）上培养，可以产生大量的圆球茎，圆球茎进一步发育成芽苗。切取圆球茎或带愈伤组织的芽苗，转移到新鲜的培养基（2）中，继代增殖培养，继代周期为5~6周。
    生根  切取3~4cm高的粗壮芽苗转移到培养基（3）上诱导不定芽，培养2周时生根率达98%，每苗根数为3~7条。
    移栽  生根苗移栽前需要去掉瓶盖在室内锻炼3~5天，移栽基质为苔藓+腐殖土（1：1）为好。移栽后注意保持适宜的温度和较高的空气相对湿度，成活率可达100%。





蝴蝶兰组培快繁技术

    蝴蝶兰属茎短，长2~3cm，叶大。花茎1至数枚，拱形，有时有分枝，蜡状。花姿优美，颜色艳丽，为热带兰类中的珍品。原产亚洲热带。附着在树干或树蕨上生长最为适宜。北方冬季在高温温室栽培。 
    材料类别：种子
    培养条件：（暂不提供）
    种子萌发培养基：MS+BA+NAA+蔗糖
    增殖培养基：MS+BA+NAA+蔗糖
    生根培养基：1/2MS+IBA+蔗糖
    以上培养基均附加5g/l琼脂，Ph5.5~5.8。培养温度为20~25℃，光照每天10h，光照强度为2000lx。
    生长与分化：
    萌发 将生长120天以上，未开裂的蝴蝶兰蒴果剪下，以75%酒精浸泡20s，以0.1%的
HgCl2溶液处理5min后，用无菌水冲洗8min，在培养皿中以解剖刀切开果皮使种子散开，放入培养基（1）中培养。60天后种子萌发成约4cm高和具有2~3片真叶的无菌种子苗。
增殖 取无菌种子苗的茎尖接种在培养基（2）上，培养30天后基部长出愈伤组织的百分率达85%以上。继续培养形成丛生的原球茎，其比率可达90%以上。将原球茎切割成小块，仍接种于培养基（2）上，进行增殖培养。40天后每个原球茎可分化形成13~15个不定芽，并且随继代次数的增加，分化形成不定芽的数量增多。经过8~10次继代培养后，还可见到不定芽的分化。
    生根 将培养基（2）中的健壮芽接种到培养基（3）上，20天后芽基部长出小根，40天后根变得粗壮，生根率达95%以上。
    移栽 将已生根的试管苗置于炼苗室室内自然光下培养1周后，取出、洗净根部的培养基，移栽到苔藓或松树皮基质中，注意温、湿度及水肥管理，成活率达85%以上。





非洲紫罗兰组培快繁技术

    非洲紫罗兰属多年生草本，莲座状，花蓝紫色，花期5~8个月。原产非洲热带。性喜温暖、湿润、庇荫和通风良好，不耐高温，夏季要避免阳光直射。
    材料类别：叶片
    培养条件：（暂不提供）
    诱导不定芽：MS+BA+NAA
    诱导不定根：MS+NAA
    培养基中蔗糖含量为3%、琼脂0.75%，Ph值5.0。培养温度22~25℃，每日光照10~12h，光照强度1000lx。
    生长和分化：
    诱导芽 先用流水和小毛笔清洗叶面上的尘土，在清洗时可以加适量的洗洁净和洗衣粉。洗净后在79%酒精中浸泡10s，在放入0.1%HgCl2中灭菌后6~8min，灭菌后用无菌水冲洗3~4次，用无菌滤纸吸干水分，并剪成0.5cm见方的小块，接种于培养基（1）上。培养1个月或便在切口上产生大量不定芽。
    增殖 将丛生芽切割成小块，再接种于新鲜培养基（1）上，继代增殖，5~6周继代一次。
    生根 待芽伸长后切下，转到培养基（2）上诱导生根。
    移栽 将生根苗移栽于沙河或腐殖土中，移栽时勿伤苗，用温水洗净粘附的培养基，浇透水。移栽后2周内保持适宜的温度和较高的湿度，注意通风和防治杂菌。移栽成活率可达95%以上。